ATCC 细胞的培养条件因细胞类型不同而存在差异,一般可从培养基、温度、气体环境、pH 值等方面考虑,以下是一些常见的培养条件:
培养基
合成培养基:许多 ATCC 细胞可用合成培养基培养,如 MEM(Minimum Essential Medium)、DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)等。像 HeLa 细胞常用 MEM 或 DMEM 培养基,添加 10% 左右的胎牛血清,以提供细胞生长所需的营养成分。
特殊培养基:有些细胞需要特殊培养基,如 RPMI-1640 培养基常用于淋巴细胞等悬浮细胞的培养,如 Jurkat 细胞。神经细胞可能需要使用专门的神经细胞培养基,其中含有特殊的营养因子和生长因子,以支持神经细胞的生长和分化。
温度
37℃培养:大多数来源于人体和哺乳动物的 ATCC 细胞适宜在 37℃的培养箱中培养,这与人体和哺乳动物的体温相近,能为细胞提供最适的酶促反应和代谢环境。例如,A549 细胞、MCF-7 细胞等都在 37℃条件下生长良好。
特殊温度需求:也有一些细胞的最适培养温度略有不同,如昆虫细胞 Sf9 通常在 27℃左右培养,因为昆虫的生存温度环境与哺乳动物不同,该温度更适合昆虫细胞的生长和蛋白表达等生理活动。
气体环境
二氧化碳培养箱:一般 ATCC 细胞培养需要在含有 5% CO₂的培养箱中进行。CO₂的作用是维持培养基的 pH 值稳定。CO₂溶解在培养基中形成碳酸,与培养基中的碳酸氢盐缓冲体系共同作用,使培养基的 pH 值保持在合适的范围内。例如,在培养 HUVEC 细胞时,5% CO₂的环境能保证细胞正常的代谢和生长。
特殊气体需求:某些特殊细胞可能对气体环境有特殊要求,如一些厌氧菌的培养需要在无氧环境中进行,需使用专门的厌氧培养箱,提供 N₂、H₂和 CO₂等混合气体环境。
pH 值
中性偏酸至中性:多数 ATCC 细胞适宜在 pH 7.2 - 7.4 的环境中生长。但也有一些细胞例外,如杂交瘤细胞,一般在 pH 7.0 - 7.2 的环境中培养较好,偏酸性的环境有利于杂交瘤细胞的生长和抗体分泌。
其他条件
无菌环境:细胞培养过程必须在严格无菌的条件下进行,包括使用无菌的培养基、培养器皿、操作工具等,以防止细菌、真菌、支原体等微生物污染。通常在超净工作台中进行细胞操作,定期对培养箱、超净工作台等进行消毒处理。
湿度:培养箱内的湿度一般保持在 95% 左右,以防止培养基蒸发导致成分浓度改变,影响细胞生长。