细胞周期检测试剂盒

485 人阅读发布时间：2022-10-31 09:16

细胞周期（cell cycle）是指连续分裂细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程。在这个过程中，细胞遗传物质复制并加倍，且在分裂结束时平均分配到两个子细胞中去。细胞周期又可以分为间期(interphase)和有丝分裂期(M phase)，细胞间期又常划分为休眠期（G0）,DNA合成前期(G1)，DNA合成期(S)，DNA合成后期(G2)，整个周期可表示为G1→S→G2→M。DNA周期检测可用来反应细胞周期的各个期的状况，即细胞增殖状况。利用细胞内DNA能够和荧光染料(如碘化丙啶--PI)结合的特性，细胞各个时期其DNA含量不同从而结合的荧光染料不同，流式细胞仪检测的荧光强度也不一样(如下图所示)。PI-DNA复合物的最大激发波长为535 nm，最大发射波长为615 nm，PI的红色荧光在 FL2或 FL3 通道检测。每个样采集 20000～30000events。本试剂盒经过优化的配方，可获得绝的周期结果，可应用于培养细胞（悬浮、贴壁）的 DNA含量（细胞周期）检测。

组分

组分名称	数量（20T/50T）
PI Staining Buffer	10 ml /50 ml
RnaseA (10 mg/ml)	0.1 ml/0.5 ml

应用

细胞周期检测

储存

2～8℃，有效期1年。

注意事项

1. 乙醇固定后，细胞的吹打要轻柔，否则会导致细胞大量破碎。
2. 离心过程中尽可能采用吸取上清的方式，防止细胞大量丢失。
3. 无水乙醇要事先冻存于-20℃。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。

实例

图：将融合度90%的A549细胞细胞分两组，一组作为对照组正常培养，另一组向培养基中加入终浓度为5mM的喜树碱处理24h后收集细胞，用细胞周期检测试剂盒（）处理后上流式细胞仪检测，ModFit软件分析，结果如图。结果表明：实验组经过喜树碱处理后S期明显高于对照组，说明喜树碱处理后明显抑制了A549细胞的增殖，数据CV值RCS值很小，试剂盒检测效果良好。

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