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人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)Elisa试剂盒

人阅读 发布时间:2020-07-28 10:14

                                                                        如需更加详细的说明书文档,请联系右侧在线客服索取
使用目的:
本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中的指标含量
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本指标水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,HRP标记的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算浓度。
试剂盒组成
1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1 7 终止液 6ml×1
2 酶标试剂 6ml×1 8 标准 0.5ml×1
3 标包被 12孔×8 9 标准品稀释液 1.5ml×1
4 样品稀释液 6ml×1 10 说明书 1
5 显色剂A 6ml×1 11 封板膜 2张  
6 显色剂B 6ml×1/ 12 密封袋 1
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可在小试管中进行稀释。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟   
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外
7. 温育:操作同3
8. 洗涤:操作同5
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
10. 终止:每孔加终止50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)
11. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值) 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
 
 

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